|
|
INDICE
INTRODUCCION......................................................................................... 1
OBJETIVOS
...............................................................................................
10
MATERIALES Y METODOS ....................................................................... 11
1- Animales................................................................................
11
2- Material biológico.................................................................
11
· Ovocitos ováricos.................................................. 11
· Ovocitos celómicos................................................11
· Folículos ováricos...................................................12
· Glándula
pineal........................................................12
· Suero de Bufo arenarum....................12
3- Incubaciones..........................................................................
13
4- Determinaciones bioquímicas............................................. 13
 |
Determinación de la capacidad oxidativa
mitocondrial.....13
|
 |
Determinación de
proteinas................................................. 15
|
 |
Radioinmunoanálisis
(RIA)................................................... 15
|
 |
Determinación de
gonadotrofinas........................................ 15
|
 |
Determinación de esteroides ováricos...............................
16
|
 |
b
-estradiol...............................................................................
16
|
 |
Progesterona..........................................................................
16
|
 |
Dihidrotestosterona................................................................
17
|
5- Criterios de maduración ovocitaria......................................
17
 |
Maduración citoplasmática.........................................
17
|
 |
Maduración
nuclear...................................................... 18
|
 |
Técnicas histológicas...........................................................
18
|
 |
Para microscopía óptica................................................
18
|
 |
Para microscopía electrónica de transmisión..............
19
|
 |
Técnica de
rutina.............................................................
19
|
 |
Determinación ultraestructural de Ca2+........................
19
|
 |
Técnica para la detección
ultrahistoquímica de Ca-ATPasa...................................
20
|
7- Microfotografías.................................................................................
20
8- Hormonas y productos químicos................................................... 21
9- Análisis estadístico............................................................................
21
10- Soluciones y reactivos...................................................................... 22
RESULTADOS .......................................................................................................... 23
CONTROL ENDOCRINO DE LA MADURACION DE OVOCITOS DE BUFO ARENARUM ......
23
1- Regulación hormonal de la maduración citoplasmática................ 23
1.1-Rol de la glándula pineal................................................................ 23
1.1.a- Participación de la glándula pineal en el comportamiento metabólico de ovocitos ováricos y celómi-cos...................................................................................... 23
1.1.b- Influencia de la melatonina en el metabolismo de ovocitos ováricos................................................................................... 25
1.1.c- Análisis de la interacción melatonina-hipófisis........................... 27 |
|
1.1.c- Participación de la glándula pineal y de la melatonina en la ovulación |
|
|
|
1.2- Análisis histológico de la glándula pineal de Bufo arenarum............. 31
1.3- Rol de esteroides ováricos en la maduración citoplasmática............ 34
1.3.a- Niveles hormonales en suero de Bufo arenarum........................ 34
1.3.b- Efecto de 17 b
-estradiol............................................................... 35
1.3.c- Efecto de progesterona................................................................ 36
2- Regulación hormonal de la maduracion nuclear................................ 36
2.1- Rol de las hormonas esteroideas...................................................... 36
2.1.a- Efecto de progesterona. ............................................................ 36
2.1.b- Efecto de 17 b
-estradiol. ............................................................ 39
2.1.c- Efecto de DHT............................................................................. 40
2.2-Relación entre melatonina y maduracion nuclear. ............................ 41
2.3- Rol de hormonas proteicas en la maduración nuclear...................... 42
2.3.a- Estudio del efecto de insulina...................................................... 42
2.3.b- Efecto de FSH.............................................................................. 45
3- Análisis de los cambios subcelulares durante la maduración nuclear inducida por progesterona........................................ 47
3.1- Características del folículo control..................................................... 47
3.2- Folículo tratado con progesterona..................................................... 50
CONTROL NERVIOSO DE LA MADURACION DEL OVOCITOS
DE BUFO ARENARUM
. 61
4- Inervación del ovario
..............................................................................
61
5- Influencia neurovegetativa en la maduración citoplasmática
............. 64
5.1- Acción de catecolaminas en el metabolismo de ovocitos ováricos.... 64
5.2- Efecto de catecolaminas en ovocitos celómicos................................ 66
5.3- Análisis del efecto de agonistas y antagonistas
adrenérgicos en la maduración citoplasmática........................... 67 |
5.4- Acción de acetilcolina ........................................................................ 72
6- Regulación neurovegetativa de la maduración nuclear
...................... 72
DISCUSION....................................................................................................... 74
Control de la maduración citoplasmática...........................................
74
1- Factores inhibidores ...................................................................... 74
2- Factores estimulantes................................................................... 78 |
|
|
Control de la maduración nuclear....................................................... 82
1- Factores inhibidores ..................................................................... 82
2- Factores estimulantes................................................................... 83 |
Cambios subcelulares durante la maduración nuclear inducida por progesterona......................................................................................... 85
CONCLUSIONES ................................................................................................. 88
........................................... 74
1- Factores inhibidores ...................................................................... 74
2- Factores estimulantes................................................................... 78 |
|
Control de la maduración nuclear....................................................... 82
1- Factores inhibidores ..................................................................... 82
2- Factores estimulantes................................................................... 83
Cambios subcelulares durante la maduración nuclear inducida por progesterona......................................................................................... 85
CONCLUSIONES ................................................................................................. 88
REFERENCIAS ................................................................................................. 90
|
|