ACCIÓN DE LOS INHIBIDORES DE LA TRIPSINA SOBRE LA FECUNDACIÓN

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   Los datos presentados hasta aquí, permiten suponer que en el mecanismo de penetración de los espermatozoides intervienen proteinasas acrosómicas y que las mismas no son utilizadas para atravesar la ganga.
   Con el objeto de explorar la validez de las presunciones que se desprenden de las observaciones anteriores, se utilizaron inhibidores de proteinasas. Los mismos fueron ensayados en dos sistemas experimentales uno de ellos utiliza ovocitos con ganga y el otro ovocitos sin ganga adicionados de los factores que hacen posible su fecundación. Para este tipo de experiencias resultó mas adecuado trabajar con los ovocitos y espermatozoides de Bufo arenarum, los resultados obtenidos muestran que cuando los inhibidores se encuentran presentes en el medio de inseminación, se observa una disminución significativa en el porcentaje de fecundación. El grado de inhibición depende de la presencia o no de ganga y del tipo de inhibidor utilizado. Entre ellos el parece ser el mas efectivo (Tabla 10). 

  A una concentración de 1 mg/ml los porcentajes de fecundación caen hasta alrededor de un 10% utilizando ovocitos con ganga, mientras que en el sistema sin ganga se consigue igual efecto con solo 0,01 mg /ml. El ovomucoido no parece afectar la fecundación de los ovocitos con ganga aún a concentraciones tan altas como 10 mg/ml, mientras que en el otro sistema muestra un moderado efecto inhibitorio (Tabla 11). El mostró un efecto intermedio en ambos sistemas (Tabla 12 ). La diferencia de efectividad de los distintos inhibidores para bloquear la fecundación, puede explicarse en razón de su diferente capacidad inhibitoria sobre enzimas proteolíticas. Por otra parte, la diferencia de efectividad de un mismo inhibidor en los dos sistemas utilizados, puede ser debida a una variación de la concentración efectiva del mismo por la presencia o no de la ganga.
   Con el objeto de descartar una acción eventual del inhibidor no relacionada con la fecundación, se trataron ovocitos ya fecundados con cada inhibidor en la mayor concentración utilizada. No se observó inhibición de la segmentación en ninguno de los sistemas utilizados.
Observaciones realizadas adicionando inhibidores a las suspensiones de espermatozoides indicaron que la motilidad de los mismos se mantenía. Cabe destacar además que el examen de las tiras, luego de inseminarlas, indicó que en todos los casos los espermatozoides llegaron a la membrana vitelina.

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