1. INTRODUCCIÓN: EFECTO DE LOS FACTORES AMBIENTALES SOBRE LAS BACTERIAS

2. EFECTO DE LA TEMPERATURA

2.1. EFECTO DE LA TEMPERATURA SOBRE EL CRECIMIENTO

2.2. EFECTO LETAL DEL CALOR

2.3. EFECTO DE LAS BAJAS TEMPERATURAS

3. LIOFILIZACIÓN

4. DESECACIÓN

BARRA DE EXPLORACIÓN: Microbiología General

Debido a su pequeño tamaño y a su estilo de vida individual, las células procarióticas sufren los cambios ambientales de un modo mucho más directo e inmediato que las células de los organismos pluricelulares. A lo largo de miles de millones de años, las bacterias han venido estando sometidas a diversas presiones ambientales, y han respondido evolutivamente creando numerosos mecanismos de adaptación. Actualmente, las únicas formas de vida existentes en determinados ambientes extremos son exclusivamente procarióticas. Desafiando a nuestras ideas preconcebidas de lo que es la vida "normal", encontramos extraordinarios seres vivos unicelulares viviendo a pH muy ácidos o muy alcalinos, medrando en salmueras y salinas, o reproduciéndose a temperaturas de más de 100ºC y a grandes presiones...En este capítulo y en el siguiente veremos algunas de estas notables adaptaciones.

Hasta ahora hemos venido considerando el crecimiento de las bacterias en función de su fondo genético, en relación con los nutrientes, y en unas hipotéticas condiciones ideales (óptimas). Sin embargo, el trabajo experimental con microorganismos ha de tener en cuenta los factores ambientales, es decir, una serie de agentes físicos y químicos que

1. modifican la velocidad de crecimiento, provocando cambios que, a determinados valores de dichos factores pueden llegar a ocasionar la muerte de microorganismos;
2. condicionan la distribuición de los microorganismos en sus ecosistemas y hábitats naturales;
3. permiten a los humanos controlar el crecimiento microbiano, por medio de la fijación de parámetros para:
1. la mutagénesis,
2. la esterilización y desinfección,
3. la quimioterapia.

No todos los microorganismos toleran del mismo modo un determinado factor ambiental. Así, unas determinadas condiciones pueden ser nocivas para una especie bacteriana, y en cambio ser neutras o beneficiosas para otra.

Antes de abordar el estudio de distintos agentes ambientales, conviene distinguir entre los efectos que un determinado agente puede tener sobre la viabilidad y los efectos que pueden simplemente afectar al crecimiento, a la capacidad de diferenciación (si la hubiera) o de reproducción.

Los principales tipos de factores a considerar se pueden desglosar de la siguiente manera:

La temperatura es uno de los parámetros ambientales más importantes que condicionan el crecimiento y la supervivencia de los microorganismos.

La temperatura afecta a la velocidad de crecimiento (y, por lo tanto al tiempo de generación, g). Cada bacteria (y suponiendo que el resto de condiciones ambientales se mantienten constantes) muestra una curva característica de tasa de crecimiento en función de la temperatura, donde podemos distinguir tres puntos característicos llamados temperaturas cardinales:

• temp0 mínima: por debajo de ella no hay crecimiento;
• temp0 máxima: por encima de ella tampoco existe crecimiento;
• temp0 óptima: permite la máxima tasa de crecimiento (o sea, g mínimo).

El margen entre la temperatura mínima y la máxima se suele llamar margen de crecimiento, y en muchas bacterias suele comprender unos 40 grados.

La temperatura mínima se puede explicar en función de:

• un descenso de la fluidez de la membrana, de modo que se detienen los procesos de transporte de nutrientes y el gradiente de protones;
• un aumento de la viscosidad del citoplasma;
• un debilitamiento de los enlaces hidrófobos de las proteínas(debido a cambios físicos en la estructura del agua de solvatación) que provoca inactivación de enzimas alostéricos y de actividad funcional de los ribosomas. En muchos casos los polisomas no se ensamblan.

Por encima de la temperatura mínima la tasa de crecimiento va aumentando proporcionalmente hasta alcanzar la temperatura óptima, debido a que las reacciones metabólicas catalizadas por enzimas se van aproximando a su óptimo. En dicha temperatura óptima las enzimas y reacciones se dan a su máxima tasa posible.

A partir de la temperatura óptima, si seguimos subiendo la temperatura se produce un descenso acusado de la tasa de crecimiento hasta alcanzar la temperatura máxima. Dicha temperatura refleja:

• desnaturalización e inactivación de proteínas enzimáticas esenciales;
• colapsamiento de la membrana citoplásmica;
• lisis térmica de la bacteria.

Obsérvese en el gráfico que la temperatura óptima está más cerca de la máxima que de la mínima.

Cada especie o cepa bacteriana tiene temperaturas cardinales distintas, de modo que una bacteria puede presentar una temperatura óptima superior a la temperatura máxima de otra, o inferior a la temperatura mínima de una tercera.

Según el rango de temperaturas al que pueden crecer las distintas bacterias, se pueden establecer tres tipos principales:

1. psicrófilas o criófilas: crecen a partir de entre -5 a 5^oC.
1. Las llamadas psicrófilas obligadas tienen t0 óptima a 15-18^oC y t0 máxima a19-22^oC, como por ejemplo Flavobacterium. La bacteria Polaromonas vacuolata, recientemente aislada en aguas heladas de la Antártida es lo que pudiéramos llamar un psicrófilo extremo: tiene su óptimo de crecimiento en 4ºC, y es incapaz de crecer a 14ºC.
2. Las psicrófilas facultativas (también llamadas psicrotrofas) presentan t0 óptima en torno a los 20-30^oC y máximas a los 35^oC.
2. Las mesófilas presentan t0 mínimas a los 10-15^oC, óptimas a los 25-40^oC y máximas entre 35 y 47^oC. La mayor parte de las bacterias (incluyendo las patógenas) pertenecen a esta categoría.
3. Las termófilas presentan mínimos a 25^oC, óptimos a 50-75^oC y máximos entre 80 y 105^oC. Dentro de esta categoría se suele distinguir las termófilas extremas (=hipertermófilas), que pueden llegar a presentar óptimos cercanos a los 100^oC, y que taxonómicamente pertenecen al dominio de las Archaea.
1. Las termófilas estrictas (o estenotermófilas), con óptimos por encima de los 80ºC son de hecho incapaces de crecer a menos de 37^oC, como las citadas arqueas (ej., Thermoproteus, Pyrococcus, Pyrodictium). La arquea Pyrolobus fumarii, habitante de los humeros termales submarinos tiene su óptimo nada menos que a 105ºC y puede llegar a aguantar 113ºC, y parece detiene su metabolismo (por "frío") a la "agradable" temperatura de 90ºC (!)
2. Las termófilas facultativas (o euritermófilas) pueden crecer a menos de 37^oC, como p. ej. Thermus aquaticus.

Veamos brevemente unos cuantos casos de bacterias (y algún microorganismo eucariótico) adaptado a medios con temperaturas extremas, y sus respectivas adaptaciones a dichas condiciones:

Ejemplos de medios permanentemente fríos son la mayor parte de las aguas oceánicas (cuya temperatura media es de unos 5^oC, pero que en las profundidades alcanzan sólo 1-2^oC por encima de cero) y las áreas permanentemente heladas del Ártico y de la Antártida.

En los medios helados existen pequeñas bolsas o microcavidades de agua líquida, donde pueden medrar algunos microorganismos. Un ejemplo no bacteriano muy característico es el alga de las nieves (Chlamydomonas nivalis), que llega a conferir color rojo a la nieve en algunas zonas de montaña a mitad de la estación estival.

Los psicrotrofos (psicrófilos facultativos) son más abundantes, ya que están adaptados a soportar grandes oscilaciones térmicas, y en verano pueden crecer a unos 30^oC-40ºC.

Algunas bacterias y hongos pueden crecer en alimentos (carne, leche, frutas y hortalizas) que se guardan en frigoríficos, alterando las cualidades organolépticas e incluso, echándolos a perder (una experiencia que casi todos hemos tenido).

Las principales adaptaciones bioquímicas a medios fríos exhibidas por estos microorganismos son:

• enzimas más resistentes al frío;
• sistemas de transporte adaptados a bajas temperaturas;
• los fosfolípidos de la membrana celular aumentan la proporción de ácidos grasos insaturados (y en algunas bacterias, poliinsaturados); ello supone que la membrana sigue en su estado semifluido, evitándose su congelación.

Los hábitats naturales con temperaturas permanentemente altas (por encima de 45-50^oC) están restringidos a unas pocas zonas de la biosfera, normalmente relacionadas con fenómenos volcánicos:

• fuentes termales volcánicas terrestres (en zonas de EE UU, Japón, Nueva Zelanda e Islandia);
• fuentes termales submarinas: los llamados "humeros" (fumarolas hidrotermales) asociados a las grandes dorsales oceánicas);
• fumarolas.

Como ejemplo "clásico", muy conocido por documentales de divulgación, recordemos que en el famoso Parque Nacional de Yellowstone, en EE UU, existe la mayor concentración mundial de fuentes volcánicas, con géiseres que emiten a más de 100^oC, siendo esta temperatura bastante constante, con oscilaciones de +/- 1 ó 2^oC. Cuando esta agua sale, lo hace a punto de ebullición. El riachuelo que genera va bajando su temperatura en su recorrido, de modo que se genera un gradiente de temperatura en el que se pueden estudiar fascinantes comunidades microbianas adaptadas a esas diversas temperaturas. Allí fue donde T.D. Brock descubrió la eubacteria termófila Thermus aquaticus, de la que se extrae la ADN polimerasa termorresistente empleada en la reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Recientemente se está recurriendo a usar la polimerasa de una arquea hipertermófila, Pyrococcus furiosus, que funciona muy bien a 100ºC.

Si confeccionamos una tabla donde se agrupen distintos seres vivos en función de las temperaturas máximas a las que pueden vivir comprobaremos (Fig.1) que los procariotas, como conjunto aguantan más que los eucariotas. Dentro de los procariotas, las bacterias no fotosintéticas crecen a mayores temperaturas que las fotosintéticas. Obsérvese que existen bacterias con óptimos a 55, 70 e incluso 100^oC (el asombroso Pyrodictium crece a 110^oC). Como ya dijimos, el "récord" de termofilia lo tienen ciertas arqueobacterias (como la que acabamos de citar), y crecen a esas temperaturas a gran velocidad (tiempos de generación g del orden de 1-7 horas).

Se han aislado bacterias termófilas en medios artificiales, como calentadores de agua domésticos e industriales.

Las principales adaptaciones bioquímicas a altas temperaturas en células vegetativas bacterianas son:

• enzimas termorresistentes. Algunas de ellas tienen un interior molecular muy hidrófobo;
• ribosomas termorresistentes;
• membranas ricas en ácidos grasos saturados, que permiten enlaces hidrofóbicos más fuertes.
• En Arqueas hipertermófilas los lípidos son muy especiales: en vez de basarse en ésteres de ácidos grasos con el glicerol, se trata de éteres de hidrocarburos unidos al glicerol (el enlace éter es más resistente). Algunas, además, en vez de la típica bicapa lípídica, exhiben una monocapa bioquímica de C₄₀-bifitanil-tetraéteres (resultado de unirse "cola con cola" dos C₂₀-fitanil-diéteres), que condicionan una extrema resistencia a agentes ambientales.

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Al subir la temperatura por encima de la temperatura máxima de crecimiento, se dejan sentir los efectos sobre la viabilidad: la pérdida de viabilidad significa que las bacterias dejan de ser capaces de crecer y dividirse, aun cuando las transfiramos a un medio idóneo. La muerte por calor es una función exponencial de primer orden:

dN/dt = -K_T·N

O sea, y como se puede constatar en el gráfico adjunto, la acción del calor supone la muerte de una fracción constante (K_T) de la población sobreviviente en cada momento.

La cinética de primer orden sugiere que no existen efectos acumulativos, sino que la muerte se debe a la destrucción o inactivación irreversible de una molécula o estructura esencial (como p. ej. el ADN cromosómico o por creación de un daño irreparable en la membrana).

En la práctica podemos encontrarnos con gráficos distintos al anterior, debidos a desviaciones respecto de esta cinética:

)Cómo podemos caracterizar o medir en la práctica la inactivación por calor de una suspensión bacteriana? Hé aquí algunos parámetros utilizados:

• tiempo térmico mortal: es el tiempo mínimo requerido para que mueran todas las bacterias de una determinada suspensión a una determinada temperatura;
• tiempo de reducción decimal: es el tiempo requerido para reducir al 10% la densidad de la suspensión, a una determinada temperatura (también llamado valor D);
• punto térmico mortal: es la temperatura mínima que mata a todas las bacterias en un tiempo determinado (normalmente el tiempo de referencia empleado es de 10 min).

Ejemplos

Estos tres parámetros se emplean frecuentemente en industrias alimentarias, como en las de fabricación de conservas, centrales lecheras, etc.

Antes de seguir adelante, es importante tener claro que, dependiendo de la temperatura y el tiempo a que sometamos un material a tratamiento térmico, lograremos inactivación parcial de la población microbiana (es decir, queda una fracción de células viables) o bien esterilización (=inactivación total).

En general, entendemos por esterilización todo tratamiento de un material con un agente físico (como el calor, que nos ocupa en este momento) o químico (como veremos en el capítulo 19) que acarrea la eliminación de toda forma de vida en él. Una vez estéril, el material sigue estéril indefinidamente con tal de que esté encerrado en un compartimento estanco, sellado y libre del contacto con microorganismos del ambiente exterior.

Centrándonos de nuevo en el calor, la inactivación parcial o la esterilización se pueden lograr por calor húmedo o por calor seco.

La inactivación (total o parcial) por calor se debe a la desnaturalización de proteínas y a la fusión de lípidos de membrana, debido a que se rompen muchos enlaces débiles, sobre todo los puentes de hidrógeno entre grupos C=O y H₂-N . Estos enlaces se rompen más fácilmente por calor húmedo (en atmósfera saturada de vapor de agua), debido a que las moléculas de agua pueden desplazar a los puentes de hidrógeno

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Por lo tanto, la inactivación por calor húmedo requiere menores temperaturas que la que se realiza en ausencia de agua. Veamos algunos ejemplos de condiciones de inactivación total por calor húmedo:

Veamos los métodos principales de lograr esterilización de materiales por calor húmedo:

Autoclave (introducido por Chamberland en 1884)

Es un aparato que permite calentar muestras por calor húmedo a temperaturas superiores a las de ebullición del agua (sin que ésta hierva), debido a que el tratamiento se efectúa en un compartimento estanco saturado con vapor de agua y a presiones superiores a la atmosférica. (El funcionamiento del autoclave será oportunamente explicado en clases prácticas). Los parámetros de esterilización suelen ser: temperatura 121^oC y 10-15 min. Como se puede deducir, estos parámetros vienen fijados por la resistencia de las esporas de especies saprofitas (ver última línea de la tabla anterior), que son las formas de vida que más aguantan el calor sin perder viabilidad.

(Hay que tener en cuenta que, en la práctica, a veces hay que emplear condiciones diferentes; por ejemplo: si queremos esterilizar grandes volúmenes de líquido, habrá que prolongar el tratamiento, 30 o 40 min, ya que el centro del recipiente donde va el líquido tarda más en alcanzar la temperatura de esterilización. Los medios de cultivo que incluyen glucosa deben esterilizarse a 115^oC, ya que a temperaturas superiores la glucosa "carameliza"; por lo tanto, en estas ocasiones, el tiempo también es mayor: 30 min).

La acción rápida del calor húmedo depende en buena parte del alto valor de calor latente del agua (540 cal·g^-1); ello hace que los objetos más fríos (como las muestras a esterilizar) se calienten rápidamente por condensación de agua en su superficie.

Tindalización (nombre en honor de John Tyndall)

Es un método de esterilización fraccionada para materiales que se inactivan o estropean a más de 100^oC. Consiste en someter el material a varios ciclos (normalmente 3 ó 4) de dos fases sucesivas cada uno:

1. en la primera fase el material se calienta a una temperatura entre 50 y 100^oC, durante 1 ó 2 horas;
2. en la segunda fase el material se incuba en una estufa, a 30-37^oC durante 24 horas.

Durante las fases de tipo a) mueren todas las células vegetativas de la muestra, pero permanecen viables las esporas, que quedan activadas para germinar. Durante las fases de tipo b) se produce la germinación de las esporas activadas en la respectiva fase anterior. En la siguiente fase de tipo a) morirán las células vegetativas procedentes de la germinación en la fase anterior; y así sucesivamente, hasta que al cabo de unos cuantos ciclos no queda ningun microrganismo en la muestra.

Como se puede ver, este método es bastante engorroso y consumidor de tiempo, por lo que en los últimos años ha sido reemplazado por otro método de esterilización, aunque ya no dependiente del calor: se trata de la esterilización por filtración. Consiste de hacer pasar una solución a través de una membrana o filtro de un tipo de material (normalmente nitrato de celulosa) que presenta poros de un tamaño inferior al de cualquier célula bacteriana (diámetro de poro =0,22 m m).

1. En la práctica cotidiana del laboratorio de microbiología, en la esterilización de medios de cultivo y soluciones.
2. En la esterilización de material quirúrgico.
3. En la esterilización o inactivación parcial, en las industrias alimentarias (conservas, leche y derivados).

En la industria conservera se emplean los parámetros ya estudiados de punto térmico mortal y tiempo térmico mortal; este último permite elegir la temperatura que altera menos las cualidades del material a conservar.

El tiempo térmico mortal varía según:

el tipo de material: normalmente, los materiales ácidos (tomates, frutas) requieren menos tiempo que los neutros (como el maíz o las alubias).

la concentración de azúcares, proteínas o grasas: una mayor concentración de este tipo de sustancias supone emplear más temperatura y/o más tiempo.

la concentración de sales: puede obligar a aumentar o disminuir los valores de tiempo y temperatura, dependiendo del tipo de microorganismos.

En la industria láctea se emplean como métodos de esterilización el autoclave o la llamada uperización.

La uperización consiste en un tratamiento de calor húmedo donde se emplean temperaturas muy altas durante unos pocos segundos (p. ej.: 135-150^oC durante 1-2 seg).

Pero no siempre es imprescindible esterilizar la leche, sino que puede bastar eliminar los posibles microorganismos patógenos que pueden contaminarla, y que son más sensibles al calor que los saprófitos inofensivos. Con esta inactivación parcial de la población microbiana de la leche logramos que ésta se conserve durante unos días, sin alterar apenas sus cualidades organolépticas y nutricionales. He aquí los procedimientos más habituales para conseguir esto:

La pasteurización (en honor a Pasteur, que la introdujo en los años 1860) consiste en tratar la leche a 63^oC durante 30 min, tras los cuales se enfría y envasa rápidamente.

La pasteurización instantánea (también conocida por sus siglas en inglés HTST, de high temperature-short time) se logra calentando a 72^oC durante sólo 15 segundos, tras de lo cual la muestra se enfría rápidamente. Esta técnica es la más usada actualmente, ya que:

• mata más rápidamente;
• mata mejor organismos más resistentes;
• altera menos el sabor;
• actúa en flujos continuos (y permite procesar grandes volúmenes de leche).

Tras la pasteurización, el número de bacterias viables desciende un 97-99%. Los potenciales patógenos que pueda llevar la leche (Brucella, Salmonella, bacilo tuberculoso, Streptococcus, etc) son eliminados fácilmente.

La pasteurización también se emplea para la preparación de vacunas a base de microorganismos inactivados por el calor.

Como ya dijimos, la esterilización por calor seco necesita recurrir a mayores temperaturas que la efectuada por el calor húmedo, ya que al no existir agua, la rotura de puentes de hidrógeno y la desnaturalización de proteínas, así como la fusión de membranas, se efectúan a mayores energías. Otros efectos del calor seco son los daños por oxidación y el provocar un aumento de la concentración de electrolitos.

1. El llamado horno de Pasteur, mediante calentamiento a 160-170^oC durante 2-3 horas permite esterilizar materiales inertes de laboratorio resistentes al calor: material de vidrio y metálico, aceites y jaleas, etc.
2. Flameado a la llama (hasta el rojo) de asas metálicas de siembra, con las que se inoculan las bacterias.
3. Incineración de materiales de desecho.

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Las bajas temperaturas (por debajo de la temperatura mínima) no son útiles para la esterilización, ya que, aunque existen algunas bacterias que mueren por congelación (p. ej., especies patógenas de Neisseria), el efecto de este tratamiento sobre otras muchas es, sobre todo, bacteriostático, sin contar aquellos organismos psicrófilos o psicrotrofos.

Los efectos de someter una suspensión bacteriana a temperaturas menores de 0^oC dependen de:

• el medio donde están suspendidas las bacterias;
• el modo en que se realice la congelación y una ulterior descongelación.

Cuando la temperatura es ligeramente inferior al punto de congelación del medio, el citoplasma queda en sobrefusión (sin congelar) entre -1 y -10^oC. Pero como la tensión de vapor de agua en el interior es mayor que en el exterior, existe una tendencia a restablecer el equilibrio, que puede ser:

• por pérdida de agua de la célula (cuando la congelación se efectúa lentamente), o bien
• por cristalización de agua en el interior (cuando la congelación se realiza rápidamente).

En ambos casos la consecuencia es que las sales intracelulares se concentran, lo que supone que la solución del citoplasma puede llegar a saturarse, con precipitación de sales. Ello conlleva varias consecuencias:

• los cristales de sales y la alta concentración de electrolitos provocan la desnaturalización de proteínas y daños a la membrana, de modo que pueden salir componentes del citoplasma (fosfato, ribosa, péptidos y nucleótidos, procedentes de la actuación de ribonucleasas y peptidasas latentes).
• Otro efecto de menor importancia es el daño mecánico a la pared celular y a la membrana provocado por los cristales de hielo.

En general, el enfriamiento rápido es más lesivo que el lento, existiendo una velocidad óptima. Cuando una bacteria se enfría rápidamente a -35^oC se producen cristales de hielo que provocan daños cuando la muestra se descongela.

Por lo tanto, otro factor a tener en cuenta es la manera de realizarse la descongelación, y el número de ciclos de congelación-descongelación. La descongelación lenta es más letal que la rápida, ya que aumenta el volumen de cristales de hielo.

El grado de muerte por congelación se puede desglosar en dos componentes:

1. El efecto inmediato: muertes que ocurren al congelarse la muestra;
2. El efecto de almacenamiento, consistente en la lenta pérdida de viabilidad debida al tiempo que permanecen las bacterias sobrevivientes en estado congelado, y que depende de la temperatura a la que se mantenga la muestra.

La congelación se aplica, en laboratorio, para preservar muestras bacterianas durante largos periodos de tiempo. Como acabamos de ver, y con objeto de maximizar la viabilidad bacteriana el mayor tiempo posible, es importante cómo se efectúa tanto la descongelación como la descongelación. Una vez congeladas, las bacterias supervivientes conservan su viabilidad durante mucho tiempo, siempre que la temperatura se mantenga por debajo del punto eutéctico.

• en nieve carbónica (CO₂ sólido), a -78^oC;
• en nitrógeno líquido, a -180^oC.

Por ello, este método es usado en el laboratorio para guardar cultivos durante largas temporadas. El inconveniente de emplear nieve carbónica o nitrógeno líquido es que hay que reponerlos con relativa frecuencia. Como veremos enseguida, hay métodos menos engorrosos y caros de mantener viables muestras microbianas durante largos periodos de tiempo.

Para preservar aún mejor las bacterias a bajas temperaturas, se recurre a añadir a la suspensión ciertas sustancias, como por ejemplo:

• Sustancias no ionizables de bajo peso molecular que provocan la solidificación amorfa y vítrea, en lugar de la cristalización, evitando así la formación de zonas intracelulares con alta concentración de sales: glicerina, sacarosa, lactosa, dimetilsulfóxido (DMSO).
• Materiales ricos en proteína: leche, suero, extracto de carne.
• Proteínas purificadas (p. ej., la albúmina).
• Determinadas macromoléculas: polivinilpirrolidona (PVP), dextranos.

La suspensión bacteriana puede aguantar varios meses congelada con estas sustancia a -25 a -30^oC, en congelador.

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La liofilización es la desecación al vacío de una muestra previamente congelada. Aplicada a bacterias, es uno de los métodos que mantiene por más tiempo la viabilidad bacteriana (varios años). Para obtenerla, el cultivo bacteriano se adiciona de leche o suero (véase epígrafe anterior), se congela sobre nieve carbónica (-78^oC), y se conecta a una bomba de vacío, que provoca la desecación. La eliminación de toda el agua sobre la muestra congelada aumenta la viabilidad de ésta, que se guarda en ampollas cerradas de vidrio a temperatura ambiente, hasta su uso, que como vemos, puede ser incluso muchos años después.

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La desecación al aire (sin vacío) mata a las células vegetativas bacterianas, pero no a las endosporas. La sensibilidad a la desecación varía de una especie a otra.

Ejemplos:

• Mycobacterium tuberculosis (el bacilo tuberculoso) es muy resistente al aire (en ausencia de luz), de ahí que pueda aguantar varios meses a partir de los esputos de enfermos.
• En cambio, el vibrión colérico (Vibrio cholerae) muere expuesto al aire al cabo de sólo dos horas.

Las causas de la muerte son, principalmente:

• el aumento de concentración intracelular de sales, lo que conlleva efectos tóxicos y desnaturalizantes de proteínas;
• daños por oxidación.

La mayor eficacia de la desecación al aire se logra con 50% de humedad relativa.

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NEIDHART, F.C., J.L. INGRAHAM, M. SCHAECHTER (1990): Physiology of the bacterial cell: a molecular approach. Sinauer Associates, Sunderland, Massachusetts. Consultar el capítulo 8.

MADIGAN, M.T., B.L. MARRS (1997): Extremófilos. Inv y Ciencia 249 (junio): 60-66.

DEMMING, J.W. (1987): Ecological strategies of barophilic bacteria in the deep ocean. Microbiol. Sci. 3: 205-211.

HARRISON Jr., A.P. (1984): The acidophilic thiobacilli and other acidophilic bacteria that share their habitat. Ann. Rev. Microbiol. 38: 265-292.

KRULWICH, T.A., A.A. GUFFANTI (1989): Alkalophilic bacteria. Ann. Rev. Microbiol. 43: 435-463.

MATIN, A., E.A. ANGER, P.H. BLUM, J.E. SCHULTZ (1989): Genetic basis of starvation survival in nondifferentiating bacteria. Ann.Rev. Microbiol. 43: 293-316.

ZACCAI, G., H. EISENBERG (1990): Halophilic proteins and the influence of solvent on protein stabilization. Trends Biochem. Sci. 15: 333-337.

Ó 1998 ENRIQUE IAÑEZ PAREJA. Prohibida su reproducción, salvo con fines educativos.

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